背根神經(jīng)節(jié)是位于脊椎間孔內(nèi)、靠近脊髓的神經(jīng)結(jié)節(jié)。它負(fù)責(zé)向脊髓傳遞各種感覺(jué)信號(hào)，如溫度覺(jué)、觸覺(jué)、痛覺(jué)等。

背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的體外培養(yǎng)可用于研究神經(jīng)軸突再生，從而有助于脊髓損傷的治療。

 

在研究神經(jīng)軸突再生機(jī)制時(shí)，電穿孔轉(zhuǎn)染siRNA 或質(zhì)粒是一種重要的研究方法。

對(duì)于神經(jīng)元細(xì)胞，電傳孔轉(zhuǎn)染效率顯著高于其他方法，但對(duì)細(xì)胞可能有一定損傷。

2020年9月，《中國(guó)組織工程研究》期刊在線(xiàn)發(fā)表了《無(wú)血清培養(yǎng)基和有血清培養(yǎng)基對(duì)背根神經(jīng)節(jié)生長(zhǎng)的差異》的研究，揭示出在電轉(zhuǎn)條件下，血清對(duì)背根神經(jīng)節(jié)的體外培養(yǎng)有重要作用，因此無(wú)血清培養(yǎng)基無(wú)法取代有血清培養(yǎng)基。

該研究即將刊登在2021年第13期的紙質(zhì)版期刊上。

研究人員取出小鼠的背根神經(jīng)節(jié)組織，用膠原酶消化后，分別用含5%胎牛血清的MEM培養(yǎng)基和無(wú)血清的MEM培養(yǎng)背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。

同時(shí)，用電傳孔方法轉(zhuǎn)染增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP) 質(zhì)粒至細(xì)胞內(nèi)。

培養(yǎng)3天后，觀察在光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)狀況，并進(jìn)行神經(jīng)元標(biāo)志物染色，在熒光顯微鏡下觀察，并測(cè)量軸突長(zhǎng)度。

結(jié)果顯示：

1、在電轉(zhuǎn)和非電轉(zhuǎn)條件下，無(wú)血清并不影響背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的軸突再生的長(zhǎng)度和軸突的分支。

2、在電轉(zhuǎn)的條件下，背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的存活數(shù)均減少，且電轉(zhuǎn)無(wú)血清組的細(xì)胞存活數(shù)比電轉(zhuǎn)有血清組明顯減少。

3、無(wú)論是否有血清，電傳孔傳染效率均為20%左右。

該研究揭示出，電轉(zhuǎn)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞存在一定的損傷，但血清對(duì)細(xì)胞有明顯的保護(hù)作用。該結(jié)論也可能適用于其他細(xì)胞類(lèi)型。

 

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